返回首页 客户留言 联系我们
点击这里给我发消息
点击这里给我发消息
手机:
13915810870
15190528161
电话:
0519-82318860
0519-82338860
0519-82358860
产品搜索/ Product search
产品列表/ Product list
公司名称:常州金坛精达仪器制造有限公司
地址:江苏常州金坛区华城路288-1号 5幢2号
邮编:213200
电话:0519-82318860\82338860 
联系人: 王忠
E-mail: jingda17@163.com
技术文章 当前位置:首页 < 技术文章 < 技术资讯
常见发酵染菌难题问答----发酵摇瓶机
点击次数:1309 发布时间:2013-09-25 打印本页面 返回

Q1: 为什么噬菌体在摇瓶阶段没有被发现?

回复:在摇瓶阶段,一般不会往摇瓶里面通气。因此在摇瓶阶段染噬菌体的几率比较少。如果经过长时间培养后,空气中存在大量噬菌体,Z终也会导致摇瓶培养发生污染,这时需要对摇床内部做熏蒸等灭菌措施。

 Q2: 大肠杆菌发酵过程中,出现一定的自溶情况,镜检有空泡现象。但是平板检测,无噬菌斑出现。请问这是什么原因造成的?

回复:自溶情况是在培养哪个阶段发生呢?如果出现在培养中期就发生自溶,有可能感染噬菌体。涂平板检查是否有噬菌斑,应该尽量采用双层平板,效果较好。此外,在产物产量及其他发酵参数都正常情况下,是不是因为搅拌转速较高,到对数后期后会有一部分菌体发生自溶现象。

 Q3: 如果是接种的超净台环境中有噬菌体,是不会进入种子摇瓶啊?

回复:会的,接种时超净工作台风是又上往下吹的,所以一般在超净台内操作时,我们尽量减少瓶口敞开的时间,而且尽量将摇瓶斜放,减少超净台内的气体进入瓶内。

 Q4: 想知道处理芽孢染菌时为什么需要用碱水处理发酵罐呢?

回复:根据过去做过的实验,将分离出来的芽孢杆菌,分别在不同 pH 值培养基中进行培养,发现在酸性的环境里,芽孢杆菌能生长很好,而在碱性环境里却无法生长; 此外,若罐体内部存在一些结垢,经过稀碱水处理后,结垢将变得松散,从而内部芽孢杆菌也能够释放出来,便于灭菌杀死

 Q5:甲醇如何灭菌?

回复:纯的甲醇一般不需要除菌,本身应该无菌。如果是甲醇溶液,那需要除菌,但不是放灭菌锅内灭菌,而是过滤除菌。装甲醇的补料瓶需要放入灭菌锅灭菌,若担心灭菌效果不好,可加水灭菌。过滤除菌时一定慎选过滤器种类,必须为抗有机溶剂,以避免过滤器在过滤过程中被甲醇腐蚀,一般采用PTFE,PP,PVDF,PES材质都可以耐受甲醇。此外,甲醇过滤完也可以做无菌培养实验。过程操作务必小心,一旦甲醇挥发会有毒性。

 Q6:请问芽孢杆菌消灭剂是什么?84消毒液可以吗?

回复:当时使用的芽孢杆菌杀菌剂为诺福杀菌剂,内含过氧化氢、活性胶质银离子等等;84消毒液主要成分是次氯酸钠,效果有限,因此没有前者好用。

 Q7: 补料瓶未连接前玻璃接头接的是包扎的空气过滤器吗?

回复:补料瓶管线出来所连接的玻璃接头为公头,然后通过母头和公头连接两边管路。母头的一端需加过滤器,若无过滤器,也可采用包扎的方式。除菌过滤器用锡箔纸包住,主要防止灭菌过程中有冷凝水浸湿过滤器,同时可以保证此处的灭菌温度,棉花塞住不是太方便。

 Q8:罐内死角不容忽视,发酵罐联轴器形式,哪种死角比较少,螺丝用厌氧高温密封胶涂抹可以吗?

回复:进口发酵罐罐内不会有死角,此概念在设计中已充分考虑。一般发酵罐采用直连驱动马达,而细胞罐采用磁力驱动马达。该两种驱动轴设计上不会有死角,谨记使用过程中不要随意卸载或晃动搅拌轴,导致密封圈密封性不佳即可。 您所提及的螺丝是罐盖上面的吗?在搅拌轴上的是可以涂抹,能否告诉我你要涂抹是的哪些螺丝? 此外,密封胶质量要有保证,不会在灭菌时进入罐内影响菌体生长和产物纯化

 Q9:芽孢杆菌及大肠杆菌在外观大小上区别为何?

回复:以枯草芽孢杆菌为例,大小一般为0.7~0.8×2~3微米,芽孢大小一般为0.6~0.9×1.0~1.5微米;大肠杆菌大小一般为0.4~ 0.7×1 ~3微米。

本文由整理发稿

仪表网

推荐收藏该企业网站
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站